第68章 巨大收益(求收藏,求追讀)
2024-10-31 14:07:08
第68章 巨大收益(求收藏,求追讀)
國家高技術研究發展計劃(863計劃),國家重點基礎研究發展計劃(973計劃,含重大科學研究計劃)都是國家相對超級高端的研究項目。
但凡想要拿到其中一個,都需要足夠的積累。
當然,但凡能夠拿到一個,也能讓人功成名就,幾百萬的課題經費是小菜一碟,數千萬的科研基金,也是很常見的。
而這樣的一個項目啟動資金,是袁威宏目前拿下的青年基金的百倍有餘。
再要說什麼的時候,外面做完檢查複診的病人,已經推開門。
袁威宏就不再說話,方子業也是趕緊開始薅自己的學識點,一步一步地進行閱片審視,精準診斷並用藥,然後得到了0.9的學識點。
美滋滋地開心起來。
因為即便是中南醫院,也不是那種疑難雜症遍地走的,疑難雜症自然不少,可也有簡單的病種,病人掛號的時候,可不會考慮浪費資源這樣的說法。
門診完,方子業就又得到了15點左右的學識點,這一下,即便是加點打結術到了3級,給老師送禮物。
學識點的餘額,一下子又累積到了60之多,還可以增加一個3級技能的同時,今天晚上,方子業還有細胞實驗,即將收穫,到時候觀察結果,肯定又是一筆不菲的學識點。
「師父,我先放白大褂,然後去實驗室了啊!」
「好,WB好好跑。」袁威宏交待,仿佛是在給方子業暗示,方子業在做什麼,他都瞭然於心。
方子業點了點頭,加快了腳步。
做實驗、搞錢、發文章、學識點,充實且快樂。
WB是縮寫,蛋白質免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然後利用抗體進行檢測的方法。
一個基因表達終極結果是產生相應的蛋白質(或酶)。方子業研究的HK2,其實就是生物化學糖酵解過程中的第一個限速酶己糖激酶,而HK2則是己糖激酶的縮寫,己糖激酶是催化己糖使之磷酸化的酶,它是糖酵解途徑的第一個酶,也是糖酵解途徑的絕對限速酶。
眾所周知,糖酵解是糖轉化為能量的第一步,沒有糖酵解的第一步,葡萄糖和果糖想要被正常利用,是幾乎不可能的事情,而如果依靠酮體等旁路作為有氧氧化的底材,肯定無濟於事。
因此定量檢測HK2的含量,在骨巨細胞瘤經過過表達、沉默後的絕對數量,是檢測HK2在骨巨細胞瘤發展過程中作用的一個定量證據。
Western Blot採用的是聚丙烯醯胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,「探針」是抗體,「顯色」用標記的二抗。
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原理聽起來頗為複雜,但其實真正要操作的時候,主要的步驟主要是以下幾步。
試劑準備,也就是讓蛋白質跑的跑道,需要聚丙烯醯胺凝膠電泳來提供。
然後是參賽的運動員,是把腫瘤細胞裂解之後,使得內部的蛋白質充分釋放,然後製作了標準曲線。
製作標準曲線之後,就可以讓自己處理的細胞產生的『運動員』開始上賽道了。
緊接著是電泳、轉模、免疫反應、顯影等等一系列後,通過特殊的抗體和試劑,就能夠顯示目標蛋白的膠片。
將膠片進行掃描或拍照,用凝膠圖象處理系統分析目標帶的分子量和淨光密度值……
這個過程很複雜,也相對漫長,更需要耐心。
不過,方子業反正已經下了門診,來到實驗室里,就一步一步地按部就班來做。且旁邊還有洛聽竹幫點小忙。
最後呈現出結果後,洛聽竹欣喜異常:「方師兄,你今天這個條帶顯示很清楚欸,上一次范師兄跑出來的是啞鈴狀的。」
說完,她偏頭看向方子業的成片,條帶清晰、沒有雜帶、背景乾淨!
「呈啞鈴狀一般配置膠有問題,另外還有一種可能是樣品中含有太多雜質,沒有離心下來,然後雜質沉積在孔的中間,蛋白自然被推擠到兩邊。」
「配好膠,不合格的堅決不用,不要鋌而走險。」方子業仔細想了一下原理,如此給洛聽竹解釋。
「那如果有條帶拖尾呢?」洛聽竹想了一下,又問了一個問題,應該是她跟著別人做的時候,看到過這樣的情況。
「條帶拖尾的話,一般是蛋白量濃度高或者,孵一抗濃度和時間太長。」
「蛋白含量高的話,可能是前期的文獻準備沒有確定好,我認為最有可能的是因為一抗濃度太高,作用時間太長引起。」
「當然也有其他原因。」方子業再次看了看自己的成片。
HK2與β-actin(肌動蛋白)內參兩個條帶,共有過表達、正常以及沉默三個組。
腫瘤細胞實驗的內參,特別是涉及糖酵解通路的細胞實驗內參,是不能選用常見的GAPDH(甘油醛-3-磷酸脫氫酶)的。
「你這張圖,直接用prism進行作圖就可以用了吧?」洛聽竹繼續問。
「應該差不多吧,條帶的厚度灰度差距還是蠻明顯的。拍個照,拍個照……」方子業趕緊讓洛聽竹也幫忙拍一張。
洛聽竹欣然答應,靈動得如同一隻勤勞的小松鼠。
而方子業此時,看著學識點飛速跳動到了134,一下子增加了足足七十點的學識點,也是知道啊,這一次的WB實驗,在這一個課題之中的作用占比不小,可能是支撐整個課題規模的小骨架了。
「這張照片拍得怎麼樣?」洛聽竹拍完後,問方子業。
方子業泛出姨母笑,而洛聽竹則以為自己拍照的水平還不錯,於是又咔咔地來了幾張。
然後就是清理實驗台並清洗相應的實驗器材了。
一切結束,方子業建議:「洛師妹,辛苦了,一起去吃個宵夜吧?」
洛聽竹這會兒正在左右翻看著WB成圖的照片,歪著頭點了一下:「好呀。」
……
(本章完)